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细胞凋亡与心动过速性心肌病的动物实验研究  学位论文  

  • 编号:
    065dfcde-6008-4812-88c7-dd7de14ac92e
  • 作者:
    王俊红
  • 学位授予单位:
    昆明医科大学
  • 作者单位:
  • 导师:
    韩明华;郭涛;
  • 学位:
    硕士
  • 学位授予年份:
    2007
  • 论文答辩日期:
    3000/1/1
  • 中文关键词:
    心动过速性心肌病;动物模型;心钠素;肿瘤坏死因子;细胞凋亡;快速右心房起搏;血清学诊断;
  • 摘要:

    目的:通过快速右心房起搏建立猪心动过速性心肌病的动物实验模型;运用放射免疫法测定血浆心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)和肿瘤坏死因子-a(tumour necrosis factor alpha,TNF-a)浓度,探讨ANP和TNF-a对心动过速性心肌病的临床诊断、心功能判断及长期预后的临床价值;运用TUNEL法(terminal deoxynucletidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术)检测心肌凋亡细胞,研究细胞凋亡在心动过速性心肌病中的作用,研究ANP和TNF-a与心肌细胞凋亡的关系,以探讨心动过速性心肌病的发病机制,为临床心动过速性心肌病的诊断和治疗提供依据。 方法:将15头滇南小耳猪,按性别相同、体重和月龄相近等条件,划分为5个区组,每个区组的3头猪随机采用三种处理方案:(1)起搏1周组(n=5):快速右心房起搏(起搏频率为240次/分)持续1周;(2)起搏4周组(n=5):按上述方法起搏,持续4周;(3)假手术组(n=5):予实验猪植入电极和起搏器,但不打开起搏器。起搏4周组和假手术组分别于术前、术后1周、术后2周、术后3周和术后4周抽取中心静脉血,运用放射免疫法测定血浆ANP和TNF-a的浓度变化。假手术组和起搏4周组于术后4周、起搏1周组于术后1周处死实验动物,快速取出心脏,置于中性甲醛溶液中固定,2周后制作心肌组织石腊包埋切片。运用TUNEL法检测心肌凋亡细胞,计算凋亡指数(每100个细胞核的TUNEL阳性细胞数)。 结果:两起搏组10头猪均制作成功心动过速性心肌病的动物模型;起搏4周组的血浆ANP水平较假手术组明显升高,其在起搏1周时迅速升高,随起搏时间延长呈稳定趋势,且均高于术前水平;起搏4周组血浆TNF-a水平除术后1周与假手术组无明显差别外,术后2周、术后3周、术后4周均较假手术组明显升高,随起搏时间延长呈逐渐升高趋势。两起搏组的心肌凋亡指数较假手术组均有统计学意义;起搏1周组心房组织的凋亡指数高于心室;起搏4周组心室的凋亡指数进一步升高达到高峰,而心房组织的凋亡指数较1周组有所降低,此时心室组织的凋亡指数高于心房。心房组织的凋亡细胞主要分布于心内膜内皮细胞,心室的凋亡细胞主要为心室肌细胞。心房细胞凋亡指数与ANP呈正相关;心室细胞凋亡指数与TNF-a、ANT均呈正相关,并且TNF-a对心室细胞凋亡指数变化情况的影响程度大于ANP。 结论:心动过速性心肌病时,血浆ANP、TNF-a水平显著升高,ANP水平以术后1周升高尤为明显,TNF-a水平随起搏时间延长呈逐渐升高趋势。血浆ANP、TNF-a水平可作为判断心动过速性心肌病的临床诊断、心功能分级和预后的指标。心动过速性心肌病时发生细胞凋亡,细胞凋亡的发生在心房和心室存在质和量的差异。心房细胞凋亡指数与ANT有正相关关系,即ANP越高,心房细胞凋亡指数越高。心室细胞凋亡指数与TNF-a、ANP均呈正相关,即TNF-a、ANP越高,心室细胞凋亡指数越高,TNF-a对心室细胞凋亡指数变化情况的影响程度大于ANP。ANP和TNF-a诱导心肌细胞凋亡参与心肌重构,可能是导致心动过速性心肌病的机制之一。

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