乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染能引起人类急性和慢性乙型肝炎，并可导致重型肝炎，肝硬化和肝细胞癌。HBV为嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviriade)的正类嗜肝DNA病毒属(orthohepadnavirus)。S基因是HBV的四个编码蛋白基因之一，在病毒感染过程中S基因编码的HBsAg与易感细胞表面受体结合，介导病毒对细胞的感染，S蛋白在病毒生活周期中起着关键作用。RNA干扰(RNA interference，RNAi)是由小干扰RNA分子(siRNA)诱导对与之具有序列同源性的基因转录产物mRNA进行剪切降解或翻译阻断。本研究我们设计并构建了两个靶向HBV S基因的siRNA表达质粒S1和S2，以及随机设计的用于对照的非同源siRNA表达质粒S3。首先在HepG2215(2215)细胞中评估了该siRNA表达质粒对HBV S基因表达的抑制效应，接着在2215细胞中进一步检测了它们的抗病毒活性。结果发现，在转染2215细胞48h时，HBV S基因mRNA表达量下降64％-88％，HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了60％-82％和56％-78％。此外，我们还发现S1+S2联合转染细胞中可以显著提高抑制HBV S基因的复制与表达的效率，而对照组S3无抑制效果。实验表明RNAi可能成为防治HBV感染的可行病毒防御策略。 细胞RNA干扰(RNA interference，RNAi)是20世纪90年代末发现的一种真核生物细胞在转录后引发基因沉默的分子机制，被Science杂志评为2001年世界十大科技进展之首，是近年来分子生物学最引人关注的研究进展。2006年Fire和Mello由于在RNAi机制研究中的突出贡献获得诺贝尔生理及医学奖。诱发RNAi的最关键分子是长度为19-27个核苷酸的双链RNA，称作小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，并由一系列蛋白复合物介导，对与之具有序列同源性的基因在转录、转录后、翻译等水平进行表达调控。siRNA可以由细胞内源性产生，或者外源性由病毒感染、转座子侵入或质粒转染表达。目前RNAi分子机制有待进一步阐明，但作为一种反向遗传学手段已在基因研究中被广泛运用，并已作为一种治疗策略运用于人类抵抗重大遗传性疾病和病毒性疾病的研究。
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