目的构建pSIREN-survivin/shRNA重组质粒并鉴定,为探索瘢痕疙瘩基因治疗的RNA干扰(RNAi)途径奠定基础。方法根据基因库survivin cDNA序列及Reynolds设计原则,设计并合成两端有酶切位点的65个碱基的寡核苷酸链,退火成互补双链后用T4DNA酶克隆至线性化的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中;转化大肠杆菌DH-5a菌株,提取质粒行酶切鉴定,测序分析。结果 PCR扩增片断出现465 bp大小的目的基因条带与预期结果相符;双酶切见约65 bp目的基因条带;插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致。结论成功构建重组质粒pSI...