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汉防己煎剂对小鼠胸腺的细胞毒性作用的体外实验研究学位论文

编号：

5668ea58-8f8e-48de-9dc5-620a1000cedb
作者：

李必俊
学位授予单位：

昆明医科大学
作者单位：
导师：

陈英杰;卿晨;
学位：

硕士
学位授予年份：

2006
论文答辩日期：

3000/1/1
中文关键词：

胸腺细胞;增殖抑制;细胞凋亡;汉防己煎剂;
摘要：

目的：研究汉防己(Han-Fang-Chi/Stephenia tetrandra S Moore)对昆明种小鼠胸腺的细胞增殖与细胞凋亡的影响，探讨汉防己诱导小鼠胸腺的细胞凋亡作用机制。材料与方法取昆明种小鼠的胸腺的细胞，应用原代培养技术，细胞培养后，分为对照组和药物组(汉防己煎剂浓度分别为lμg/ml，10μg/ml，5μg/ml，100μg/ml)，采用荧光显微镜观察胸腺的细胞形态学变化，用MTT法观察不同浓度汉防己煎剂对昆明种小鼠胸腺的细胞增殖的影响，用DNA凝胶电泳观察其对小鼠胸腺的细胞诱导凋亡作用，用免疫细胞化学方法，观察汉防己煎剂对小鼠胸腺的细胞Fas/Fas-L系统的影响。结果：汉防己煎剂在1-100μg/ml可不同程度抑制小鼠胸腺的细胞增殖，与对照组相比，其P为8.34μg/ml，其抑制特点是具有时间依赖性和剂量依赖性，即随着时间延长和剂量增加，其抑制作用逐渐增强；用DNA荧光染料hoechst33324和PI双染检测胸腺的细胞形态学变化，可见典型凋亡细胞的各种形态学变化，包括细胞核浓缩、染色质边集、凋亡小体的形成等，并且随时间延长(从6h到24h)，凋亡细胞数显著增加，与对照组相比，其．P<0.01；DNA凝胶电泳结果可见典型的“DNAladder”，而未处理细胞则未见有梯形条带；免疫细胞化学可观察到，药物组的胸腺的细胞膜上和细胞浆中有Fas与Fas-L的强阳性表达，而对照组则不明显，两者比较有显著性差异(P<0.05)，说明汉防己诱导胸腺的细胞凋亡与Fas/Fas-L系统有关，可能通过促进Fas/Fas-L基因的表达，使Fas/Fas-L的表达调高，而通过Fas/Fas-L死亡受体途径来调控信号转导，从而诱导胸腺的细胞的凋亡。结论不同浓度汉防己(1-100μg/ml)可不同程度抑制昆明种小鼠胸腺的细胞的增殖，促进其凋亡，汉防己诱导胸腺的细胞凋亡可能通过Fas/Fas-L系统而诱导。
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汉防己煎剂对小鼠胸腺的细胞毒性作用的体外实验研究 学位论文

汉防己煎剂对小鼠胸腺的细胞毒性作用的体外实验研究学位论文