乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年增高趋势.对乳腺癌预后相关因素的研究,目前已是国内外研究的热点.有关细胞凋亡相关基因在恶性肿瘤的发生发展中的作用的研究日益受到人们的重视.bcl-2和bax是目前所知的一对作用相反的凋亡抑制和促进基因之一,而两者的平衡对细胞凋亡起着重要作用.本研究旨在探讨凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白及CD57抗原在乳腺典型髓样癌、不典型髓样癌和硬癌中表达的临床意义.材料和方法:61例标本来源于上海肿瘤医院及我院1990~2000年乳腺癌存档蜡块,其中硬癌10例,不典型髓样癌30例,典型髓样癌21例.以10﹪中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,4um厚连续切片.采用S-P免疫组化法检测bcl-2、bax、CD57蛋白表达情况,阳性结果判断:bcl-2、bax阳性定位于癌细胞胞膜和/或胞浆,呈棕黄色颗粒.CD57阳性定位于淋巴细胞中的黏附自然杀伤细胞(A-NK细胞)胞膜和/或胞浆,呈棕黄色颗,以染色的阳性细胞<20﹪为阴性病例,≥20﹪为阳性病例标准,分别记录三型乳腺癌阳性的例数.TUNEL法标记(末端脱氧核苷酸转移酶介导的x-dUTP切口末端标记)细胞凋亡状态,结果判断:TUNEL法原位杂交细胞凋亡阳性信号定位于胞核,为兰黑色颗粒.图象分析:应用HPIAS-1000图象分析系统(昆明医学院病理教研室提供),在400倍光镜下,随机抽测5个视野,测定凋亡细胞数、凋亡细胞面积、组织面积及肿瘤实质面积,定量分析其数据."面密度":记数5个视野中的组织面积总和与凋亡细胞面积总和之比;"面数密度":5个视野中的凋亡细胞总数与组织面积总和之比;"实际面数密度":即5个视野中的凋亡细胞总数与实测肿瘤实质面积总和之比;凋亡细胞数:随机测量5个视野(X400倍),观察每个视野的阳性细胞,记录凋亡细胞总数,取其平均值.计算每一组乳腺癌的"面密度"、"面数密度"、"实际面数密度"、"凋亡细胞数"的均数为其"面密度均数"、"面数密度均数"、"实际面数密度均数"、"凋亡细胞均数".本研究数据应用SPSS for windows软件在计算机上统计处理.结果定量测定三型乳腺癌凋亡细胞均数、面密度均数、面数密度均数及实际面数密度均数4项指标,两型髓样癌显著高于硬癌(P<0.05);检测三型乳腺癌bcl-2、bax蛋白及癌周浸润的淋巴细胞CD57抗原阳性率,bcl-2与CD57髓样癌显著高于硬癌(P<0.05),bax在三型乳腺癌中无显著差异(P>0.05).结论1、髓样癌尤其是典型髓样癌临床预后比硬癌好,与细胞凋亡水平高有关.2、髓样癌尤其是典型髓样癌癌周浸润的淋巴细胞CD57抗原阳性率比硬癌高.3、凋亡相关基因bcl-2/bax的失衡及A-NK细胞的作用与乳腺髓样癌的预后有一定关系.
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