目的 了解云南省临沧市双江县蚊虫携带乙型脑炎病毒（JEV）情况及其分子特征。方法 2023年8月，在临沧市双江县牛圈采用诱蚊灯采集蚊虫标本，经蚊种鉴定后每25只为一组采用BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离，阳性分离物分别采用黄病毒属引物进行鉴定；然后采用针对GI型JEV全长15对引物进行RT-PCR扩增，测序、拼接，采用MEGAX、DNAstar、GeneDoc、SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学软件进行序列分析。结果 共采集到三带喙库蚊1300只，分52组进行病毒分离，获得1株阳性分离株（SJM23-22），接种C6/36和BHK-21细胞后均出现细胞病变，黄病毒属引物扩增为阳性。对该株病毒全序列测定拼接后，获得一条10 840个核苷酸长序列，编码3 432个氨基酸；基于全基因序列和E基因序列构建的遗传进化分析结果显示：新分离SJM23-22与柬埔寨GIa型毒株（C081）的亲缘关系最近，编码区核苷酸同源性为98.5%，氨基酸同源性为99.8%，而与其它基因型编码区核苷酸同源性均在90%以下，氨基酸同源性均在98%以下；位点分析结果显示与减毒活疫苗株SA14-14-2在E基因上共有22个氨基酸差异位点，其中在8个与神经毒力相关氨基酸关键位点上，存在7个位点差异；重要抗原表位分析结果显示：双江分离株与减毒活疫苗株在结构域Ⅲ中的3个重要抗原表位完全一致；二级结构及三级结构预测结果显示：该毒株以无规则卷曲为主要结构特征。结论 在双江县三带喙库蚊中分离1株GIa型JEV，与抗原性表位相关的关键氨基酸位点未发生明显改变。本研究丰富了云南省双江县三带喙库蚊携带病毒情况，为我省虫媒疫情的防控提供了参考。
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